O método de preparação do meio pó seco em líquido é aproximadamente o mesmo, e as etapas gerais são as seguintes:
Preparar materiais:
Certifique-se de ter água pura suficiente para cultura de células ou grau injetável, bem como aditivos necessários, como solução de bicarbonato de sódio a 7,5%, solução de L-glutamina 200 mM, solução de ácido clorídrico 1N e solução de hidróxido de sódio 1N.
Pó seco dissolvido:
Despeje o meio em pó seco em um recipiente.
Use uma quantidade apropriada de água (geralmente água pura de grau de cultura celular ou de grau de injeção) para dissolver completamente o pó seco.
Certifique-se de que a quantidade total de água seja 2/3 da quantidade total de meio líquido necessária.
Ajustar o valor do pH:
Use um medidor de pH ou uma tira de teste de precisão de pH para ajustar o pH do meio ao nível desejado, geralmente 7,2-7,4.
Adicione aditivos:
De acordo com as instruções do produto e requisitos experimentais, adicione a quantidade adequada de bicarbonato de sódio, L-glutamina e outros aditivos.
Filtração para remoção de bactérias:
A membrana de filtro microporosa de 0,22um foi usada para filtrar e remover bactérias para garantir a esterilidade do meio.
Salvar:
O meio líquido preparado foi armazenado longe da luz a 2°C ~ 8°C.
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Observe:
1. A proporção específica e as etapas de preparação podem variar de acordo com as diferentes marcas e tipos de meio em pó seco, portanto, as instruções na embalagem do meio devem ser lidas atentamente antes do uso.
2. O teste de estéril deve ser realizado após a preparação do meio de cultura para detectar se há contaminação no meio de cultura.
3. A quantidade de líquido preparada em cada lote deve ser utilizada por cerca de 2 semanas, para evitar a perda de nutrientes por muito tempo.